
微型双光子显微镜是一类将双光子激发原理小型化、轻量化的在体成像 设备,通常采用飞秒脉冲近红外激光(≈800–1100 nm)经光纤耦合输入, 利用GRIN梯度折射率物镜或微型扫描组件将焦点送入脑组织,实现对神经元 树突与胞体的亚细胞分辨率成像。相较单光子系统,它具备更深的成像深度 与更低的散射背景,适合自由行为小鼠皮层/海马等区域的钙成像与血管动力 学研究。典型特征包括:头载质量≤2–5 g、成像视场≈0.3–1.0 mm、轴向分 辨率≈2–5 µm、成像深度可达≈500–700 µm、帧率10–30 Hz,荧光信号经 光纤回传至机架侧PMT/SiPM探测,整机通过微型振镜或MEMS扫描实现快 速采样。该平台兼容行为学同步、闭环光遗传刺激与多模态传感,为神经环 路在自然状态下的功能解析提供高时空分辨工具。
1. 神经科学中脑组织及神经元活动的深层成像;
2. 生命科学领域的活体组织与细胞三维成像;
3. 微型生物样品或模型系统的原位观察;
4. 光学材料及微结构的非线性光学表征;
5. 高校教学与前沿显微成像科研平台建设。
1. 多光子非线性激发机制优势显著。双光子与三光子成像利用非线性吸收特性,仅在焦点处发生激发,显著抑制离焦背景,提高成像对比度。
2. 三光子成像具备更深成像潜力。三光子激发波长通常位于1300–1700 nm波段,在高散射组织中具有更低散射损耗,适合毫米级深层成像。
3. 微型化与高性能兼顾。通过优化光路、扫描模块与探测结构设计,在紧凑体积下保持优良的空间分辨率与系统稳定性。
4. 成像环境友好,适合长期活体研究。低光毒性与低光漂白特性使系统适用于长时间、重复成像实验。
5. 系统扩展性强。支持多通道探测、功能模块扩展及定制化配置,满足不同科研方向的实验需求。
原理与技术突破:微型化的“光剑”
双光子显微镜的核心优势在于近红外光激发:利用双光子吸收效应,只有激光焦点处的荧光分子会被激活,从而实现深层成像(可达皮层下数百微米)、低光毒性(减少对细胞的损伤)和高空间分辨率(亚微米级别)。艾博纳微型双光子显微镜的关键突破,是将这套复杂系统压缩到极致:
- 轻量化设计:将物镜、扫描模块等核心部件集成到仅2-3克重的探头中,小鼠佩戴后可自由活动,无明显行为干扰;
- 光纤传输:探头通过纤细的光纤与外部激光源、探测器连接,既保证了成像质量,又避免了有线束缚;
- 高稳定性:优化的光学结构确保长时间成像的稳定性,即使动物奔跑、跳跃,也能清晰捕捉神经元动态。
应用场景:从神经科学到疾病研究
艾博纳微型双光子显微镜的应用,已深入生命科学多个领域,成为揭示自然状态下生物过程的“眼睛”。
1. 神经科学:行为与神经活动的“对话”
神经科学的核心问题之一是“行为如何由神经活动编码”。借助该设备,科学家首次实现了自由活动小鼠的脑区动态成像:
- 记忆研究:小鼠跑迷宫时,海马区的特定神经元集群会同步放电,标记“空间位置”;当小鼠回忆路径时,这些集群再次激活,揭示了记忆形成的神经机制;
- 社交行为:观察小鼠与同伴互动时,前额叶皮层的神经元会出现动态响应,帮助解析自闭症等社交障碍的神经基础;
- 应激反应:记录小鼠面对天敌气味时,杏仁核的神经元快速激活,阐明恐惧情绪的传递路径。
2. 疾病研究:动态追踪病理进程
在疾病模型中,该设备可实时观察病理变化:
- 肿瘤研究:活体小鼠肿瘤内,血管生成、免疫细胞浸润的动态过程被清晰捕捉,为抗癌药物的疗效评估提供直观依据;
- 神经退行性疾病:阿尔茨海默病模型小鼠中,淀粉样蛋白沉积对神经元活动的影响被长期监测,揭示疾病进展的早期信号;
- 代谢疾病:观察肥胖小鼠下丘脑的食欲调节神经元活动,为肥胖治疗提供新靶点。
3. 发育生物学:胚胎动态的“直播”
在胚胎发育研究中,该设备可无创观察:
- 斑马鱼胚胎中,心脏细胞的迁移与分化过程;
- 小鼠胚胎神经系统的形成,追踪神经前体细胞的命运决定。
优势:超越传统的“自然观察”
与传统双光子显微镜相比,艾博纳微型设备的优势显著:
- 自然状态优先:动物无需固定,行为不受限,数据更贴近真实生理;
- 长时间成像:低光毒性支持连续数小时甚至数天的观察,适合研究记忆巩固、疾病进展等长期过程;
- 多模态兼容:可与光遗传、电生理等技术结合,实现“光控神经元+成像”“电信号+钙信号同步记录”,深入解析神经回路功能。
未来展望:向更高精度与更广应用迈进
艾博纳微型双光子显微镜仍在进化:
- 更高分辨率:突破亚微米限制,实现单突触水平的成像;
- 多色成像:同时标记神经元、胶质细胞、血管等多种结构,揭示细胞间的协同作用;
- 非人灵长类应用:将探头适配到猕猴等动物,为临床转化铺路(如帕金森病、抑郁症的非人灵长类模型研究);
- 临床潜力:未来或可用于人类微创成像,如脑外科手术中的实时肿瘤边界识别。
结语
艾博纳微型双光子显微镜的出现,不仅是成像技术的飞跃,更是研究思维的转变——从“控制下的观察”走向“自然状态下的探索”。它让科学家得以在最真实的环境中,倾听细胞的“对话”,理解行为的“编码”,为大脑功能解析、疾病机制研究、药物研发提供了前所未有的工具。未来,这把微型“光剑”将继续照亮生命科学的未知领域,推动人类对自身的认知不断深入。
艾博纳微纳米科技有限公司是一家位于苏州市高新区(Medpark)和江苏省淮安市的高科技企业,成立于2022年8月。公司专注于高端光学科学仪器和医学成像设备的研发、制造与销售。
其产品涵盖显微成像解决方案、真空与镀膜技术以及光学元件,产品范围从基础光学显微镜到先进的纳米级三维成像显微镜。
公司还致力于新一代人工智能驱动的科学设备研发,聚焦于纳米尺度二维材料电子器件(如石墨烯芯片)的应用研究,并结合诺贝尔奖获奖技术进行创新探索。
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